上课就上课。
见了部长的威风,李述不仅坚定了继续当警察的念头,也想明白了,没必要有所保留。
一个警校刚毕业不久的小警察,这么短的时间,就成长为部里认可的权威专家。
自己身上的光芒,早就已经闪耀如太阳。
既是如此,那再闪耀一点儿又如何。
就系统那些资料,要不是外部技术条件达不到,全拿出来又如何。
理解不了,那就甭理解了,知道自己厉害,有办法就行。
李述直接拉过来一块黑板。
“倪主任说的,陈旧精斑有两个难题,外层质膜氧化脆弱,在第一步的时候,男性检材容易过度裂解,随着女性上清一块儿被丢弃。”
李述在黑板上唰唰唰写字。
叶琳几人已经自动摊开笔记本,准备做记录。
至于倪静松,推了推眼镜,表情无比专注。
李述继续写:“那么第二个问题,就是二硫键交联,高度致密,dtt溶液无法破裂,内部dna无法彻底释放。”
“至于接下来纯化扩增的问题,那是后面的问题,先把这两个问题解决。”
倪静松不住点头,听的就是这个。
李述也不废话,直接说自己的方法和思路,指着第一步道:“现有裂解做法,56摄氏度1到2个小时,裂解过程过于激烈,我觉得可以选择更温和的方法,比如低温。”
这话相当于点睛之笔,李述一说出口,倪静松和叶琳俩人同时抓到了重点,迅速流露出思索的表情。
李述继续解释道:“56摄氏度,是蛋白酶k的最适温度,而温度降低之后,它的活性会降低,再降低浓度,如此一来,它的裂解过程就会放缓,达到我们温和裂解的目的。”
所谓慢工出细活,对比女性上皮细胞,男性精子的抗性会更强,在低活性的蛋白酶k中,更容易存活下来。
“而且低温会降低细胞膜的流动性,也有利于保护精子的细胞膜,避免提前破裂。”
从自己得到的资料看,低温状态下处理陈旧混合精斑,是未来常用的一种方法。
但眼下,以倪静松他们的认知,显然是不知道这一点。
倪静松迅速的和叶琳对视一眼。
他们俩可以跟上李述的节奏,关键是没这么干过。
那就无法验证真假。
不过倪静松乍听下来,觉得李述思路没问题。
既然陈旧的精子脆化了,那就该选择更温和的裂解方式。
低温,降低浓度,都是可行的选择。
关键是多低的低温,多少的浓度,这不是嘴上说说就行的。
他想问,但李述没给他询问的机会。
李述直接开始解释第二步的思路,既然精核变得更致密,寻常的dtt溶液无法彻底释放dna,那就反着来,加大浓度,
这一下,倪静松没忍住,抢先插话道:“李述,你思路没问题啊。”
释放不彻底,那加大浓度就完了,非常合理。
别说李述一个天才,就是随便一个研究生,面对这个难题的时候,可能都会想到这样的解决方案。
但为什么没有这样的方案,就是因为这玩意儿浓度高了之后,会有大量的残留,导致下一步pcr扩增无法完成。
国外发明这方法的时候,给出的浓度就是低浓度,是业内已经验证多年的黄金标准。